コートジボワールにおけるマラリアの負担の近年の減少は、主に長期残効型殺虫剤蚊帳（LIN）の使用によるものです。しかし、この進歩は殺虫剤耐性、ハマダラカ（Anopheles gambiae）個体群の行動変化、そして残存するマラリア伝播によって脅かされており、追加の対策手段が必要となっています。そこで本研究の目的は、LLINとバチルス・チューリンゲンシス（Bti）の併用による有効性を評価し、LLINと比較することです。
本研究は、2019年3月から2020年2月にかけて、コートジボワール北部のコロゴ保健地域において、2つの研究群（LLIN + Bti群とLLINのみ群）で実施されました。LLIN + Bti群では、ハマダラカ（Anopheles）の幼虫生息地にLLINに加えて2週間ごとにBtiを散布しました。幼虫と成虫の蚊を採取し、標準的な方法を用いて属と種を形態学的に同定しました。メンバーはアンです。ガンビアの複合感染は、ポリメラーゼ連鎖反応法を用いて判定されました。マラリア原虫Anの感染率も評価されました。ガンビアおよび現地住民におけるマラリアの発生率も評価しました。
全体的に、ハマダラカ（Anopheles spp.）の幼虫密度は、LLIN + Bti 群の方が LLIN 単独群よりも低く、0.61 [95% 信頼区間 0.41–0.81] 幼虫/ダイブ（l/ダイブ）3.97 [95% 信頼区間 3.56–4.38] l/ダイブ（相対リスク = 6.50、95% 信頼区間 5.81–7.29、P < 0.001）でした。S. gambiae による咬傷の発生率は、LLIN + Bti 単独群では 1 人 1 泊あたり 0.59 [95% 信頼区間 0.43–0.75] 回であったのに対し、LLIN のみの群では 1 人 1 泊あたり 2.97 [95% 信頼区間 2.02–3.93] 回でした（P < 0.001）。ガンビエハマダラカ（Anopheles gambiae sl）は、主にハマダラカ（Anopheles mosquito）として同定されています。ガンビエハマダラカ（ss）が最も多く（95.1%、n = 293）、次いでガンビエハマダラカ（4.9%、n = 15）でした。調査地域におけるヒト血液指数は80.5%（n = 389）でした。LLIN + Bti群のEIRは1人あたり年間1.36回の感染咬傷（ib/p/y）であったのに対し、LLINのみの群のEIRは47.71 ib/p/yでした。LLIN + Bti群におけるマラリア発生率は、291.8‰（n = 765）から111.4‰（n = 292）へと大幅に減少しました（P < 0.001）。
LLINとBtiの併用により、マラリアの発生率が大幅に減少しました。LLINとBtiの併用は、マラリアの効果的な制御のための有望な統合アプローチとなる可能性があります。ガンビアはマラリアの感染が根絶されています。
過去数十年にわたるマラリア対策の進歩にもかかわらず、サハラ以南のアフリカではマラリアによる負担が依然として大きな問題となっています[1]。世界保健機関（WHO）は最近、2023年には世界中で2億4,900万人がマラリアに罹患し、推定60万8,000人がマラリア関連で死亡すると報告しました[2]。WHOアフリカ地域は、世界のマラリア症例の95%とマラリアによる死亡の96%を占めており、妊婦と5歳未満の乳幼児が最も影響を受けています[2, 3]。
アフリカにおけるマラリアの負担を軽減する上で、長期残効性殺虫剤蚊帳（LLIN）と屋内残留噴霧器（IRS）が重要な役割を果たしてきた [4]。これらのマラリア媒介動物制御ツールの拡大により、2000年から2015年の間にマラリア発生率が37%減少し、死亡率が60%減少した [5]。しかし、2015年以降に観察された傾向は驚くべきほど停滞し、あるいは加速さえしており、マラリアによる死亡者は、特にサハラ以南のアフリカで依然として容認できないほど高いままである [3]。いくつかの研究では、主要なマラリア媒介動物であるハマダラカにおける、公衆衛生で使用される殺虫剤に対する耐性の出現と拡大が、LLINとIRSの将来的な有効性に対する障壁であると特定されている [6,7,8]。さらに、屋外や夜間の早い時間帯における媒介動物の刺咬行動の変化が、残留マラリアの伝播の原因となっており、懸念が高まっている [9,10]。残存伝播の原因となる媒介生物を制御する上でのLLINとIRSの限界は、現在のマラリア撲滅活動における大きな制約となっている[11]。さらに、マラリアの持続性は、幼虫の生息地の形成に寄与する気候条件と人間活動によって説明される[12]。
幼虫発生源管理（LSM）は、繁殖地の数とそこに含まれる蚊の幼虫と蛹の数を減らすことを目的とした、繁殖地に基づいたベクター制御アプローチです [13]。 LSMは、マラリアベクター制御のための追加の統合戦略としていくつかの研究で推奨されています [14, 15]。 実際、LSMの有効性は、屋内と屋外の両方でマラリアベクター種の刺咬に対して二重の効果をもたらします [4]。 さらに、バチルス・チューリンゲンシス・イスラエレンシス（Bti）などの幼虫駆除剤ベースのLSMによるベクター制御は、マラリア制御の選択肢の範囲を広げることができます。 歴史的に、LSMは米国、ブラジル、エジプト、アルジェリア、リビア、モロッコ、チュニジア、ザンビアでのマラリア制御の成功に重要な役割を果たしてきました [16,17,18]。 LSM は、マラリアを根絶した一部の国では総合的病害虫管理において重要な役割を果たしてきましたが、アフリカではマラリア媒介昆虫管理の政策や実践に広く統合されておらず、サハラ以南アフリカの一部の国での媒介昆虫管理プログラムでのみ使用されています。国 [14,15,16,17,18,19]。その理由の 1 つは、繁殖地が多すぎて見つけるのが難しいため、LSM の実施に非常に費用がかかるという広く信じられていることです [4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 13, 14]。そのため、世界保健機関は数十年にわたって、マラリア媒介昆虫管理に動員される資源は LLIN と IRS に集中すべきであると推奨してきました [20, 21]。世界保健機関が、サハラ以南アフリカの特定の状況で LLIN と IRS を補完するものとして LSM、特に Bti 介入の統合を推奨したのは 2012 年になってからでした [20]。 WHOがこの勧告を行って以来、サハラ以南のアフリカでの生物幼虫駆除剤の実現可能性、有効性、コストに関するいくつかのパイロット研究が実施され、LSMがハマダラカの密度とマラリア伝染効率を低減する効果があることが実証されています[22, 23]。。、24]。
コートジボワールは、世界でマラリアの負担が最も高い15か国のうちの1つです[25]。コートジボワールのマラリアの蔓延は世界のマラリア負担の3.0％を占め、推定発生率および症例数は住民1000人あたり300人から500人以上に及びます[25]。11月から5月までの長い乾季にもかかわらず、マラリアは同国の北部サバンナ地域で年間を通じて蔓延しています[26]。この地域のマラリア伝染は、熱帯熱マラリア原虫の無症候性キャリアが多数存在することと関係しています[27]。この地域で最も一般的なマラリアベクターは、ハマダラカ（SL）です。地域の安全。ガンビエハマダラカは主にガンビエハマダラカ（SS）で構成されており、これは殺虫剤に非常に耐性があるため、残留マラリア伝染の危険性が高い [26]。 LLINの使用は、現地のベクターの殺虫剤耐性のためにマラリア伝染の削減に限られた効果しか及ぼさない可能性があり、そのため大きな懸念事項のままである。 BtiまたはLLINを使用したパイロット研究では、コートジボワール北部の蚊媒介動物の密度を減らすのに有効であることがわかっている。しかし、この地域でBtiとLLINを組み合わせて繰り返し使用した場合のマラリア伝染とマラリア発生率への影響を評価した研究はこれまでない。したがって、本研究では、コートジボワールの北部地域の4つの村でLLIN + BtiグループとLLIN単独グループを比較することにより、LLINとBtiの併用がマラリア伝染に及ぼす影響を評価することを目的とした。 LLINに加えてBtiベースのLSMを実施することで、LLIN単独の場合と比較してマラリア蚊の密度をさらに低減し、付加価値を高めることができるという仮説が立てられました。Btiを保有するハマダラカの幼虫とLLINを保有するハマダラカの成虫を標的とするこの統合アプローチは、コートジボワール北部の村落など、マラリアの流行地域におけるマラリア伝播の抑制に極めて重要である可能性があります。したがって、本研究の結果は、サハラ以南のマラリア流行国における国家マラリア媒介制御プログラム（NMCP）にLSMを含めるかどうかの判断に役立つ可能性があります。
本研究は、コートジボワール北部のコロゴ衛生地域にあるナピエルドゥグ県（別名ネイピア）の4つの村で実施された（図1）。研究対象の村：カコロゴ（北緯9°14′2″、東経5°35′22″）、コレカカ（北緯9°17′24″、東経5°31′00″）、ロフィネカハ（北緯9°17′31″）、北緯5°36′24″）、ナンバティウルカハ（北緯9°18′36″、東経5°31′22″）。2021年のナピエルドゥグの人口は31,000人と推定され、州は2つの保健センターがある53の村で構成されている[28]。マラリアが医療機関への受診、入院、死亡の主な原因となっているナピエルドゥグー州では、ハマダラカ媒介生物の駆除にはLLINのみが使用されている[29]。両研究グループの4つの村はすべて同じ保健センターの管轄下にあり、本研究ではその保健センターのマラリア症例の臨床記録を調査対象とした。
調査地域を示すコートジボワールの地図。（地図の出典とソフトウェア：GADMデータとArcMap 10.6.1。LLIN長期持続型殺虫ネット、Bti Bacillus thuringiensis israelensis
ネーピア保健センターの対象人口におけるマラリア有病率は 82.0% (2038 件) に達した (Bti 以前のデータ)。4 つの村すべてで、各世帯は 2017 年にコートジボワール NMCP から配布された PermaNet® 2.0 LLIN のみを使用しており、カバー率は 80% を超えている [25, 26, 27, 28, 30]。これらの村は、コートジボワール国家軍事評議会の監視拠点となっているコルホゴ地域に属しており、一年中アクセス可能である。4 つの村にはそれぞれ少なくとも 100 世帯とほぼ同じ人口があり、健康登録 (コートジボワール保健省の作業文書) によると、毎年数件のマラリア症例が報告されている。マラリアは主に熱帯熱マラリア原虫 (Plasmodium falciparum) によって引き起こされ、マラリア原虫によって人に感染する。ガンビエ蚊は、この地域ではハマダラカ（Anopheles）およびハマダラカ・ニリ（Anopheles nili）によっても媒介される[28]。この地域のガンビエ複合病原体は主にハマダラカ（Anopheles）から構成される。ガンビエSSは、高頻度のkdr変異（頻度範囲：90.70～100％）と中程度のace-1アレル（頻度範囲：55.56～95％）を有する[29]。
年間平均降水量と気温はそれぞれ1200～1400mm、21～35℃で、相対湿度（RH）は58%と推定されています。本調査地域はスーダン型気候で、乾季（11月から4月）と雨季（5月から10月）がそれぞれ6ヶ月ずつあります。この地域では、植生の喪失や乾季の長期化など、気候変動の影響がいくつか見られており、ハマダラカ（Anopheles）の幼虫の生息地となり得る水域（低地、水田、池、水たまり）の干上がりが顕著になっています。蚊[26]
本調査は、カコロゴ村とナンバティウルカハ村を代表とするLLIN + Btiグループと、コレカハ村とロフィネカハ村を代表とするLLINのみのグループで実施されました。調査期間中、これらの村の住民はいずれもPermaNet® 2.0 LLINのみを使用していました。
LLIN（PermaNet 2.0）とBtiの組み合わせによる、ハマダラカおよびマラリアの伝染に対する有効性は、LLIN + Btiグループ（治療グループ）とLLIN単独グループ（対照グループ）の2つの研究アームによるランダム化比較試験（RCT）で評価されました。LLIN + BtiスリーブはKakologoとNambatiourkahaによって代表され、KolékahaとLofinékahaはLLINのみのショルダーとして設計されました。4つの村すべてで、地域住民は2017年にコートジボワールNMCPから受け取ったLLIN PermaNet® 2.0を使用しています。ネットワークは同じ方法で受け取ったため、PermaNet® 2.0の使用条件は異なる村で同じであると想定されています。LLIN + Btiグループでは、住民がすでに使用しているLLINに加えて、ハマダラカの幼虫生息地に2週間ごとにBtiが処理されました。村落内および各村落の中心から半径2km以内の幼虫生息地は、世界保健機関（WHO）およびコートジボワール国立蚊帳（NMCP）の勧告に従って処理された[31]。一方、LLINのみの投与群は、研究期間中、幼虫駆除剤であるBtiによる処理を受けなかった。
Bti の水分散性顆粒 (Vectobac WG、37.4% wt、ロット番号 88–916-PG、3000 国際毒性単位 IU/mg、Valent BioScience Corp、米国) を 0.5 mg/L の用量で使用しました。 16 L の背負式噴霧器とハンドルおよび流量 52 ml/秒 (3.1 L/分) の調整可能なノズルを備えたグラスファイバー製スプレーガンを使用します。 10 L の水を含む噴霧器を準備するには、懸濁液で希釈された Bti の量は 0.5 mg/L × 10 L = 5 mg です。 たとえば、設計水流量が 10 L の領域で、10 L の噴霧器を使用して一定量の水を処理する場合、希釈する必要がある Bti の量は 0.5 mg/L × 20 L = 10 mg です。 10 mg の Bti は、電子スケールを使用して現場で測定されました。 10Lの目盛り付きバケツに、ヘラを用いてこの量のBtiを混ぜ、スラリーを調製します。この用量は、現代の研究対象地域とは異なるが類似した地域において、自然環境下におけるハマダラカ（Anopheles spp.）およびイエカ（Culex spp.）の様々な齢期に対するBtiの有効性に関する圃場試験の結果に基づいて決定されました[32]。幼虫駆除懸濁液の散布量と各繁殖地への散布期間は、繁殖地の推定水量に基づいて算出されました[33]。Btiは、校正済みのハンドスプレーを用いて散布します。ネブライザーは、個々の訓練中および様々な場所で校正および試験を行い、適切な量のBtiが散布されることを確認します。
幼虫の繁殖地への最適な散布時期を見つけるため、研究チームは散布時期を特定しました。散布時期とは、薬剤を散布することで最適な効果が得られる期間のことです。本研究では、散布時期はBtiの持続性に応じて12時間から2週間の範囲でした。繁殖地における幼虫によるBtiの吸収には、明らかに午前7時から午後6時までの時間が必要です。こうすることで、大雨の期間を回避でき、雨天時には散布を中止し、天候が許せば翌日に再開することができます。散布日と正確な日時は、観測された気象条件によって異なります。背負式散布機を望ましいBti散布量に調整するために、各技術者は散布機のノズルを目視検査して設定し、圧力を維持するための訓練を受けています。調整は、単位面積あたりに適切な量のBti処理剤が均等に散布されていることを確認することで完了します。幼虫の生息地への散布は2週間ごとに行います。幼虫駆除活動は、経験豊富で十分な訓練を受けた4名の専門家の支援を受けて実施されます。幼虫駆除活動および参加者は、経験豊富な監督者によって監督されます。幼虫駆除処置は乾季の2019年3月に開始されました。実際、以前の研究では、繁殖場所が安定し、その数も減少するため、乾季は幼虫駆除介入に最も適した時期であることが示されている[27]。乾季に幼虫を駆除することで、雨季に蚊が寄ってくるのを防ぐことが期待されます。2キログラムのBtiは99.29米ドルで、治療を受けている研究グループはすべてのエリアをカバーすることができます。LLIN+Btiグループでは、幼虫駆除介入は2019年3月から2020年2月までの1年間続きました。LLIN + Btiグループでは合計22件の幼虫駆除処置が行われました。
潜在的な副作用（かゆみ、めまい、鼻水など）は、Bti 生物幼虫駆除剤ネブライザーと LIN + Bti グループに参加した家庭居住者に対する個別の調査を通じて監視されました。
人口におけるLLINの使用率を推定するため、400世帯（調査グループあたり200世帯）を対象に世帯調査を実施しました。世帯調査では、定量的な質問票法を用いました。LLINの使用率は、15歳以下の3つの年齢層に分けられました。質問票は、地元のセヌフォ語で世帯主または18歳以上の成人に記入と説明が行われました。
調査対象世帯の最小規模は、ヴォーンとモロー[34]により記載された式を使用して計算された。
nはサンプルサイズ、eは誤差、tは信頼水準から導かれる安全係数、pは母集団の親のうち、与えられた属性を持つ親の割合です。分数の各要素は一貫した値を持つため、(t) = 1.96となります。この調査におけるこの状況での最小世帯規模は384世帯でした。
本実験に先立ち、LLIN+Bti 群と LLIN 群のハマダラカ幼虫の異なる生息地タイプが特定、サンプリング、記述、地理参照、ラベル付けされました。営巣コロニーのサイズを測定するには、巻尺を使用します。その後、蚊の幼虫密度を、村ごとにランダムに選択した 30 か所の繁殖地で 12 か月間毎月評価し、研究グループごとに合計 60 か所の繁殖地を評価しました。研究エリアごとに 12 匹の幼虫サンプルがあり、これは 22 の Bti 処理に相当します。村ごとにこれらの 30 か所の繁殖地を選択する目的は、偏りを最小限に抑えるために、村と研究ユニット全体で十分な数の幼虫収集場所を捕捉することです。幼虫は 60 ml のスプーンで浸して収集しました [35]。いくつかの保育場は非常に小さく浅いという事実のため、標準的な WHO バケツ (350 ml) 以外の小さなバケツを使用する周囲10mの営巣地から、それぞれ5回、10回、または20回の潜水調査が行われた。採集された幼虫（例：ハマダラカ、イエカ、ヤブカ）の形態学的同定は、現地で直接行われた[36]。採集された幼虫は、発育段階に基づき、前齢幼虫（ステージ1および2）と後齢幼虫（ステージ3および4）の2つのカテゴリーに分類された[37]。幼虫は属ごとに、また各発育段階ごとに計数された。計数後、蚊の幼虫は繁殖地に再導入され、雨水を加えた水源で元の量まで補充された。
繁殖地は、いずれかの蚊種の幼虫または蛹が少なくとも1匹存在する場合、陽性とみなされました。幼虫密度は、同属の幼虫数を潜水回数で割ることで算出されました。
各調査は2日間連続して行われ、2ヶ月ごとに各村から無作為に選ばれた10世帯から成虫の蚊が採取された。調査期間中、各研究チームは3日間連続して20世帯のサンプル調査を実施した。蚊は標準窓トラップ（WT）および除虫菊スプレートラップ（PSC）[38, 39]を使用して捕獲された。最初に各村のすべての家に番号が付けられた。次に、各村で4軒の家を無作為に選択し、成虫の蚊の採取地点とした。無作為に選ばれた各家では、主寝室から蚊が採取された。選ばれた寝室にはドアと窓があり、前夜に人がいた。作業開始前および蚊の採取中は、蚊が部屋から飛び出すのを防ぐため寝室は閉めたままであった。WTは各寝室の各窓に蚊の採取地点として設置された。翌日、寝室から職場に侵入した蚊を午前6時から8時の間に収集しました。マウスピースを使用して作業エリアから蚊を集め、生のピースで覆われた使い捨て紙コップに保管します。蚊帳。同じ寝室で休んでいる蚊は、WT収集後すぐにピレスロイドベースのPSCを使用して捕獲されました。寝室の床に白いシーツを広げた後、ドアと窓を閉め、殺虫剤（有効成分：0.25％トランスフルトリン+ 0.20％ペルメトリン）をスプレーします。スプレー後約10〜15分で、処理した寝室からベッドカバーを取り外し、ピンセットを使用して白いシーツに止まった蚊を拾い上げ、水に浸した脱脂綿を入れたペトリ皿に保管します。選択した寝室で一晩を過ごした人の数も記録されました。収集された蚊は、さらに処理するためにすぐに現場の研究所に送られます。
実験室では、採集されたすべての蚊を形態学的に属および種まで同定した[36]。アンナの卵巣。ガンビエSLは、双眼解剖顕微鏡を用いて、スライドガラス上に蒸留水を一滴垂らし、その顕微鏡下で観察した[35]。産歴は、卵巣および気管の形態に基づいて経産婦と未産婦を区別し、また、妊娠率と生理年齢を決定するために評価した[35]。
相対指数は、新鮮に採取した血液ミールの供給源を酵素免疫測定法（ELISA）で検査することにより決定されます。ヒト、家畜（牛、羊、山羊）、および鶏の宿主からの血液を使用して、ガンビア原虫（Plasmodium gambiae）の相対指数を酵素免疫測定法（ELISA）で測定しました[40]。昆虫学的感染（EIR）は、ガンビアにおけるSL女性のAn.推定値を使用して計算されました[41]。さらに、ガンビア原虫（Plasmodium gambiae）の感染は、サーカムスポロゾイト抗原ELISA（CSP ELISA）法を使用して、経産女性の頭部および胸部を分析することにより決定されました[40]。最後に、ポリメラーゼ連鎖反応（PCR）法を使用して脚、翼、腹部を分析することにより、ガンビア原虫の種類が特定されました[34]。
マラリアに関する臨床データは、本研究に含まれる4つの村（カコロゴ、コレカハ、ロフィネカハ、ナンバティウルカハ）すべてをカバーするナピェレドゥグー保健センターの臨床相談登録簿から入手しました。登録簿のレビューは、2018年3月から2019年2月と、2019年3月から2020年2月までの記録に焦点を当てました。2018年3月から2019年2月の臨床データはベースラインまたはBti介入前のデータを表し、2019年3月から2020年2月の臨床データはBti介入前のデータを表します。Bti介入後のデータ。LLIN+BtiおよびLLIN研究グループの各患者の臨床情報、年齢、村は、健康登録簿で収集されました。各患者について、村の出身、年齢、診断、病状などの情報が記録されました。本研究で検討した症例では、医療従事者によるアルテミシニン併用療法（ACT）の実施後、迅速診断検査（RDT）および／またはマラリア顕微鏡検査によってマラリアが確認されました。マラリア症例は3つの年齢群（例えば15歳）に分類されました。1000人あたりのマラリア年間発生率は、1000人あたりのマラリア有病率を村落人口で割ることで推定されました。
この研究で収集されたデータは、Microsoft Excelデータベースに二重入力され、その後、オープンソースソフトウェアR [42]バージョン3.6.3にインポートされ、統計分析が行われた。ggplot2パッケージがプロットの描画に使用された。ポアソン回帰を用いた一般化線形モデルを使用して、研究グループ間で幼虫密度と1人1晩あたりの平均蚊刺され数を比較した。関連比（RR）測定を使用して、CulexおよびAnopheles蚊の平均幼虫密度と刺され率を比較した。Gambia SLは、LLIN + Btiグループをベースラインとして、2つの研究グループの間に配置された。効果サイズは、オッズ比と95％信頼区間（95％CI）として表された。ポアソン検定の比（RR）を使用して、各研究グループでのBti介入前後のマラリアの割合と発生率を比較した。使用された有意水準は5％であった。
本研究プロトコルは、コートジボワール保健公衆衛生省の国家研究倫理委員会（N/Ref: 001//MSHP/CNESVS-kp）、地域保健区、およびコロゴ行政の承認を得ました。蚊の幼虫および成虫を採取する前に、世帯調査参加者、所有者、および／または居住者から署名入りのインフォームド・コンセントを得ました。家族データおよび臨床データは匿名かつ機密扱いとなり、指定された研究者のみがアクセスできます。
合計1198の営巣地を調査した。調査対象地域において調査された営巣地のうち、52.5%（n = 629）がLLIN + Bti群、47.5%（n = 569）がLLINのみの群に属していた（相対リスク = 1.10 [95% 信頼区間 0.98–1.24]、P = 0.088）。概して、地域の幼虫生息地は12種類に分類され、その中で最も多くの割合を占めたのは水田（24.5%、n = 294）で、次いで雨水排水路（21.0%、n = 252）、陶器（8.3）であった。 ％、n = 99）、川岸（8.2％、n = 100）、水たまり（7.2％、n = 86）、水たまり（7.0％、n = 84）、村の給水ポンプ（6.8％、n = 81）、蹄の跡（4.8％、n = 58）、沼地（4.0％、n = 48）、水差し（5.2％、n = 62）、池（1.9％、n = 23）、井戸（0.9％、n = 11）。
全体として、研究対象地域から合計47,274匹の蚊の幼虫が採取され、LLIN + Bti群では14.4%（n = 6,796）であったのに対し、LLIN単独群では85.6%（n = 40,478）であった（（RR = 5.96）[95% CI 5.80–6.11]、P ≤ 0.001）。これらの幼虫は3つの蚊の属で構成され、主な種はAnopheles（48.7%、n = 23,041）で、次いでCulex spp.（35.0%、n = 16,562）、Aedes spp.（4.9%、n = 2340）であった。蛹は未成熟のハエの11.3%（n = 5344）を占めた。
ハマダラカ属の幼虫の全体的な平均密度。本研究では、1スクープあたりの幼虫数は、LLIN + Btiグループでは0.61 [95% CI 0.41–0.81] L/dip、LLINのみ（オプション）グループでは3.97 [95% CI 3.56–4.38] L /diveでした。ファイル1：図S1）。ハマダラカ属の幼虫の平均密度。LLINのみグループは、LLIN + Btiグループの6.5倍高かった（HR = 6.49、95% CI 5.80–7.27、P < 0.001）。処理期間中、ハマダラカは検出されませんでした。LLIN + Btiグループの幼虫は、20回目のBti処理に該当する1月から収集されました。 LLIN + Bti グループでは、初期段階および後期段階の幼虫密度が大幅に減少しました。
Bti処理の開始前（3月）、LLIN + Btiグループの初期齢ハマダラカの平均密度は1.28 [95% CI 0.22–2.35] L/dive、LLIN + Btiグループで1.37 [95% CI 0.36– 2.36] l/diveと推定されました。 l/dip. /dipはLLINアームのみです（図2A）。Bti処理の適用後、LLIN + Btiグループの初期齢ハマダラカの平均密度は、概ね0.90 [95% CI 0.19–1.61]から0.10 [95% CI – 0.03–0.18] l/dipに徐々に減少しました。LLIN + Btiグループでは、初期齢ハマダラカの幼虫密度は低いままでした。 LLINのみの群では、ハマダラカ属の幼虫密度に変動が見られ、平均密度は0.23 [95% CI 0.07–0.54] L/diveから2.37 [95% CI 1.77–2.98] L/diveの範囲でした。全体として、LLINのみの群におけるハマダラカ幼虫の平均密度は1.90 [95% CI 1.70–2.10] L/diveと統計的に高かったのに対し、LLIN群におけるハマダラカ幼虫の平均密度は0.38 [95% CI 0.28–0.47] L/diveでした。+ Bti群（相対リスク = 5.04、95% CI 4.36–5.85、P < 0.001）。
ハマダラカ（Anopheles）幼虫の平均密度の推移。2019年3月から2020年2月にかけてコートジボワール北部ネーピア地域で調査したグループが使用した初期齢（A）および後期齢（B）の蚊帳。LLIN：長期残効型殺虫剤入り蚊帳、Bti：バチルス・チューリンゲンシス（イスラエル）、TRT：処理。
LLIN + Bti群における晩齢のハマダラカ属幼虫の平均密度。処理前のBti密度は2.98 [95% CI 0.26–5.60] L/dipであったのに対し、LLIN単独群では1.46 [95% CI 0.26–2.65] l/dayであった。Bti散布後、LLIN + Bti群の後齢ハマダラカ幼虫の密度は0.22 [95% CI 0.04–0.40]から0.03 [95% CI 0.00–0.06] L/dipに減少した（図2B）。 LLINのみの群では、晩期ハマダラカ幼虫の密度は0.35 [95% CI - 0.15-0.76] l/diveから2.77 [95% CI 1.13-4.40] l/diveに増加しましたが、幼虫密度は採取日によって多少のばらつきがありました。LLINのみの群における晩期ハマダラカ幼虫の平均密度は2.07 [95% CI 1.84-2.29] l/diveで、LLIN + Bti群の0.23 [95% CI 0.11-0.36] l/diveの9倍でした（相対リスク = 8.80、95% CI 7.40-10.57、P < 0.001）。
Culex属の平均密度は、LLIN + Bti群で0.33 [95% CI 0.21–0.45] L/dip、LLIN単独群で2.67 [95% CI 2.23–3.10] L/dipであった（追加ファイル2：図S2）。Culex属の平均密度は、LLIN単独群がLLIN + Bti群よりも有意に高かった（HR = 8.00、95% CI 6.90–9.34、P < 0.001）。
イエカ属（Culex spp.）の平均密度。処理前、Bti l/dipは、LLIN + Bti群で1.26 [95% CI 0.10–2.42] l/dip、LLIN単独群で1.28 [95% CI 0.37–2.36]であった（図3A）。Bti処理後、初期のイエカ幼虫密度は0.07 [95% CI - 0.001–0.]から0.25 [95% CI 0.006–0.51] l/dipに減少した。12月以降にBti処理された幼虫生息地からはイエカ幼虫は採取されなかった。イエカ幼虫の密度は、LLIN + Bti群では0.21 [95% CI 0.14–0.28] L/浸漬液に減少しましたが、LLIN単独群では1.30 [95% CI 1.10– 1.50] L/浸漬液滴/日とより高くなりました。LLIN単独群のイエカ幼虫の密度は、LLIN + Bti群の6倍でした（相対リスク = 6.17、95% CI 5.11–7.52、P < 0.001）。
イエカ属幼虫の平均密度の変化。2019年3月から2020年2月にかけてコートジボワール北部ネーピア地域で行われた研究グループによる幼虫初期（A）および幼虫初期（B）。長期残効性殺虫剤ネット（LLIN、Bti、バチルス・チューリンゲンシス、イスラエル）、Trt処理
Bti処理前、LLIN + BtiグループとLLINグループの晩齢イエカ幼虫の平均密度はそれぞれ0.97 [95% CI 0.09–1.85]と1.60 [95% CI – 0.16–3.37] l/浸漬でした（図3B）。Bti処理開始後の晩齢イエカ種の平均密度。LLIN + Btiグループの密度は徐々に減少し、非常に高いままであったLLINのみのグループの密度よりも低くなりまし た。晩齢イエカ幼虫の平均密度は、LLIN + Btiグループで0.12 [95% CI 0.07–0.15] L/ダイブ、LLINのみのグループで1.36 [95% CI 1.11–1.61] L/ダイブでした。後期齢のイエカ幼虫の平均密度は、LLINのみのグループの方がLLIN + Btiグループよりも有意に高かった（RR = 11.19、95% CI 8.83〜14.43、P < 0.001）。
Bti処理前、テントウムシ1匹あたりの蛹の平均密度は、LLIN + Bti群で0.59 [95% CI 0.24–0.94]、LLINのみで0.38 [95% CI 0.13–0.63]であった（図4）。蛹全体の密度は、LLIN + Bti群で0.10 [95% CI 0.06–0.14]、LLINのみで0.84 [95% CI 0.75–0.92]であった。Bti処理は、LLIN + Bti群の平均蛹密度をLLINのみの群と比較して有意に減少させた（OR = 8.30、95% CI 6.37–11.02、P < 0.001）。LLIN + Bti群では、11月以降蛹は収集されなかった。
蛹の平均密度の変化。この研究は、2019年3月から2020年2月にかけて、コートジボワール北部のネーピア地域で実施されました。長期残効性殺虫ネットLLIN、Btiバチルス・チューリンゲンシス（イスラエル）、Trt処理
調査地域から合計 3456 匹の成虫の蚊が収集されました。蚊は 5 属 (ハマダラカ、イエカ、ヤブカ、カ) の 17 種に属していました (表 1)。マラリア媒介動物では、An. gambiae sl が最も多く、割合が 74.9% (n = 2587) で、続いて An. gambiae sl. funestus (2.5%、n = 86)、An null (0.7%、n = 24) でした。LLIN + Bti グループの Anna's rich. gambiae sl (10.9%、n = 375) は、LLIN 単独グループ (64%、n = 2212) よりも低かったです。peace. nli 個体は LLIN のみとグループ化されませんでした。ただし、An. gambiae と An. funestus は LLIN + Bti グループと LLIN 単独グループの両方に存在しました。
繁殖地でのBti散布前（3か月間）に開始した研究では、LLIN + Bti群の1人当たり夜行性蚊の総平均数（b/p/n）は0.83 [95% CI 0.50–1.17]と推定されたのに対し、LLIN + Bti群ではLLINのみの群で0.72 [95% CI 0.41–1.02]であった（図5）。LLIN + Bti群では、イエカによる被害は減少し、12回目のBti散布後の9月に1.95 [95% CI 1.35–2.54] bppでピークに達した後も低いままであった。しかし、LLINのみの群では、平均蚊刺率は徐々に増加し、9月に11.33 [95% CI 7.15–15.50] bp/nでピークに達した。研究期間中のどの時点でも、LLIN + Bti 群では LLIN 単独群と比較して蚊に刺される全体的な発生率が有意に低かった (HR = 3.66、95% CI 3.01–4.49、P < 0.001)。
2019年3月から2020年2月までのコートジボワール北部のネーピア地域の調査地域における蚊の咬傷率 LLIN 長期持続性殺虫剤ネット、Bti バチルス・チューリンゲンシス イスラエル、Trt処理、咬傷 b/p/夜/人/夜
ガンビアハマダラカは、研究対象地域で最も一般的なマラリア媒介動物です。 ガンビア人女性の咬傷速度。 ベースラインでは、LLIN + Bti群のb/p/n値は0.64 [95% CI 0.27–1.00]、LLINのみの群では0.74 [95% CI 0.30–1.17]でした（図6）。 Bti介入期間中、最高の咬傷活動はBti治療の12コース目に当たる9月に観察され、LLIN + Bti群では1.46 [95% CI 0.87–2.05] b/p/nのピーク、LLINのみの群では9.65 [95% CI 0.87–2.05] w/n 5.23–14.07]でした。ガンビアにおける感染率は、LLIN + Bti群（0.59 [95% CI 0.43–0.75] b/p/n）の方がLLIN単独群（2.97 [95% CI 2.02–3.93] b/p/no）よりも有意に低かった（RR = 3.66、95% CI 3.01–4.49、P < 0.001）。
アンナの咬傷速度。ガンビアSL、コートジボワール北部ネーピア地域の研究ユニット、2019年3月から2020年2月まで LLIN 殺虫剤処理済み長期持続型蚊帳、Bti バチルス・チューリンゲンシス イスラエル、Trt処理、咬傷数 b/p/夜/人/夜
合計646アンペア。ガンビアは分断されています。全体的に、地元の治安の割合。ガンビアの出産率は、LLINグループのみが使用された7月を除いて、調査期間を通して概ね70％を超えていました（追加ファイル3：図S3）。しかし、調査地域の平均出生率は74.5％（n = 481）でした。LLIN+Btiグループでは、出産率が77.5％に低下した9月を除き、出産率は80％を超える高い水準を維持しました。ただし、LLINのみのグループでは平均出生率にばらつきが見られ、最も低い推定平均出生率は64.5％でした。
389年より。ガンビアにおける個々の血液ユニットの調査では、80.5%（n = 313）がヒト由来であり、6.2%（n = 24）の女性が混合血液（ヒトと家畜の血液）を摂取し、5.1%（n = 20）が家畜（牛、羊、山羊）の血液を摂取していたことが判明しました。また、分析されたサンプルの8.2%（n = 32）は血粉陰性でした。LLIN + Bti群では、ヒト血液を投与された女性の割合は25.7%（n = 100）であったのに対し、LLINのみを投与された女性の割合は54.8%（n = 213）でした（追加ファイル5：表S5）。
計308アンペア。P. gambiae を検査し、種複合体の構成菌とP. falciparum 感染株を同定した（追加ファイル4：表S4）。調査地域には2つの「近縁種」、すなわちAn. gambiae ss（95.1%、n = 293）とAn. coluzzii（4.9%、n = 15）が共存している。Anopheles gambiae ssは、LLIN + Bti群ではLLIN単独群（66.2%、n = 204）と比較して有意に低かった（相対リスク = 2.29 [95% 信頼区間 1.78–2.97]、P < 0.001）。 LLIN + Bti グループ (3.6%、n = 11) と LLIN のみのグループ (1.3%、n = 4) では、同程度の割合のハマダラカが見つかりました (RR = 2.75 [95% CI 0.81–11 .84]、P = .118)。 ガンビアの An. SL における熱帯熱マラリア原虫感染率は 11.4% (n = 35) でした。 ファルシパルム熱帯熱マラリア原虫感染率。 ガンビアでの感染率は、LLIN + Bti グループ (2.9%、n = 9) の方が LLIN のみのグループ (8.4%、n = 26) よりも有意に低かった (RR = 2.89 [95% CI 1. 31–7.01]、P = 0.006)。ハマダラカ属の蚊と比較すると、ガンビエハマダラカのマラリア原虫感染率が最も高く、94.3% (n=32) であった。一方、ガンビエハマダラカではマラリア原虫感染率はわずか5.7% (n = 5) (RR = 6.4 [95% CI 2.47–21.04]、P < 0.001) であった。
合計400世帯から2,435人が調査対象となった。平均密度は1世帯あたり6.1人である。LLIN所有世帯は85%（n = 340）であったのに対し、LLINのない世帯では15%（n = 60）であった（相対リスク（RR）= 5.67 [95%信頼区間（CI）4.29–7.59]、P < 0.001）（追加ファイル5：表S5）。LLIN使用率は、LLIN + Bti群では40.7%（n = 990）であったのに対し、LLIN単独群では36.2%（n = 882）であった（相対リスク（RR）= 1.12 [95%信頼区間（CI）1.02–1.23]、P = 0.013）。調査地域における平均総純利用率は38.4%（n = 1842）であった。 5歳未満児のインターネット利用率は両群でほぼ同等で、LLIN + Bti群のネット利用率は41.2%（n = 195）、LLINのみの群のネット利用率は43.2%（n = 186）であった（HR = 1.05 [95% CI 0.85–1.29]、P = 0.682）。5歳から15歳までの児童では、LLIN + Bti群のネット利用率36.3%（n = 250）とLLINのみの群のネット利用率36.9%（n = 250）の間に差はなかった（RR = 1.02 [95% CI 1.02–1.23]、P = 0.894）。しかし、15歳以上の者のうち、LLIN + Bti群で蚊帳を使用した割合は42.7% (n = 554) と、LLINのみの群での33.4% (n = 439) より低かった (RR = 1.26 [95% CI 1.11–1.43]、P <0.001)。
2018年3月から2020年2月の間に、ネイピア保健センターでは合計2,484件の臨床症例が記録されました。一般人口における臨床マラリアの有病率は、全臨床病理症例（n = 2038）の82.0%でした。本研究対象地域におけるマラリアの年間発生率は、Bti治療前後でそれぞれ479.8‰と297.5‰でした（表2）。
投稿日時: 2024年7月1日